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TP Présence de chlorophylle a par chromatographie

Ce TP permet de caractériser les individus de la lignée verte

TP Présence de chlorophylle a par chromatographie

  • Matériel privilégié :

- Feuilles d’épinard

- Algues brunes (récupérées chez le poissonnier)

- Feuilles colorées à l’automne

 

  • Protocole de la chromatographie:

  

- Placer dans un mortier un peu de sable fin.

- Ajouter quelques feuilles coupées en morceaux.

- Broyer en ajoutant progressivement environ 10mL d’alcool à 90°

- Filtrer l’ensemble pour obtenir une solution vert foncé de pigments

 - Sur une bande de papier Wathman, tracer un trait au crayon à 2 cm d’une extrémité.

- Dans une éprouvette, mettre environ un demi cm de solvant organique.

- A l’aide d’une seringue, mettre une goutte de solution de pigment au centre du trait sur le papier.

- Suspendre le papier à l’aide d’un crochet de manière à ce que le solvant atteigne le papier mais ne dépasse pas le trait.

- Placer un cache noir (papier Canson) autour de l’éprouvette.

- Attendre 1 heure que la migration s’effectue.

- Comparer la chromatographie obtenue avec un document montrant le positionnement de la chlorophylle a :

 

 chromato

Chromatographie obtenue avec des feuilles d'épinard

  

  • Variante pour extraire les pigments :

Plutôt que de broyer les feuilles, il est également possible de placer une feuille au niveau du trait sur le papier et de presser avec l’extrémité d’un agitateur (la quantité de pigments sur le papier est suffisante pour la migration).

 Principe et résultat d’une chromatographie de chlorophylle brute sur épinard www.snv.jussieu.fr/.../Photosynthese/exp22.html.

 

  • Remarque :

Suivant le niveau des élèves, certaines étapes peuvent être faites par le professeur (mise en place du solvant dans l’éprouvette, filtrat de pigments…)

 

  • Capacités testées :

- Respecter un protocole.

- Confronter les données de l’expérimentation avec les résultats proposés sur un document de référence.

 

 

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