Etapes de la transgenèse
associées aux outils et techniques de biologie moléculaire

Etapes de la transgenèse	Outils et techniques associés
Repérer un caractère intéressant dans un organisme vivant : (plante, champignon, bactérie...).  Examen du génome	Cartographie du génome Séquençage
Identifier la protéine responsable de ce caractère (ex : protéine toxique pour un insecte ravageur).
Identifier et isoler le gène d'intérêt Obtention d'un mélange de fragments d'ADN. Identification d'un gène dans un mélange de fragments.	Enzyme de restriction. Southern blot
Réaliser et amplifier une construction génique Insertion d'un fragment d'ADN dans un plasmide Introduction du plasmide modifié dans le génome de la cellule hôte.	Construction génique Clonage d'un gène.
Transférer de l'ADN Introduction d'un ADN étranger ou remplacementd'un fragment d'ADN	Vecteurs biologiques (bactéries, virus) Recombinaison homologue Fusion utilisant des liposomes Transfection Utilisation du polyéthylène glycol (PEG) Micro-injection in vitro Electroporation Canon à particules
Contrôler l'efficacité du transfert chez l'hôte Par détection directe des transgènes	Hybridation in situ PCR
Sélectionner des cellules exprimant le gène ajouté Par tri	Gène de sélection Gènes rapporteurs