Le gène d'intérêt, identifié et isolé, est ici une séquence codante bactérienne de la néomycine phosphotransférase ou NPT qui confère la résistance à un antibiotique, la kanamycine.

1 - Réalisation d'une construction génique ou gène artificiel. (cf. technique de préparation d'un gène à transférer)

2 - Recombinaison puis insertion du fragment d'ADN (construction génique) dans le plasmide Ti désarmé - privé de la séquence ONC, fonction oncogène ;

Introduction du plasmide Ti modifié dans la bactérie hôte.

3 - Transfection du plasmide modifié dans des protoplastes, par Agrobacterium ( = vecteur biologique)

4 - Contrôle de l'efficacité du transfert et sélection des organes exprimant le gène transféré.