Comptage de Drosophiles issues d'un croisement
L'exemple présenté a été réalisé
avec une F2 du croisement entre une race pure sauvage et une race pure à
corps ebène et ailes vestigiales.
Préparation du travail :
- Endormissement des drosophiles à l'éther.
- Observation, à la loupe binoculaire, des parents (de manière
à reconnaître les phénotypes) et des individus de F1.
Première étape :
- Scannérisation d'une grande boîte de Pétri (environ
10 cm de diamètre) dans laquelle sont versées des Drosophiles
de F2 ou issues d'un croisement-test. Attention à
la couleur du fond utilisé : un fond vert qui fait ressortir
la couleur du corps et celle des yeux est tout à fait indiquée.
Le Scanner, réglé sur une résolution de 400 ppi, permet
d'obtenir une image suffisamment nette d'une centaine de drosophiles que l'on
pourra ensuite compter. Une webcam ne donnerait qu'une image de quelques mouches
avec une résolution suffisante. Un bon appareil photo numérique
peut aussi être utilisé.
Déclencher la scannérisation depuis le logiciel Mesurim (Menu
Fichier - Acquérir) si le scanner est compatible. Les images obtenues
et sauvegardées sont ensuite accessibles au travers du réseau
(si les postes sont reliés entre eux par un réseau). S'il n'y
a pas de réseau, copier les images sur des disquettes (choisir le
format Jpeg) et recopier les disquettes sur les postes de travail. Si le
nombre de scanner disponibles n'est pas suffisant, il est bon de placer à
l'avance sur chaque poste une première image sur laquelle les élèves
pourront travailler.
| Si vous n'avez pas les Drosophiles pour tester, charger
le fichier Drosophiles (scanné à 150 ppi). |
Deuxième étape :
- Faire afficher le compteur (menu outils - comptage).
- Choisir 4 compteurs (menu nombre de la petite fenêtre de
comptage).
- Ecrire les différents phénotypes dans les cases du
compteur.
- Activer un compteur en cliquant dans le bouton-radio correspondant
à un phénotype.
- Cliquer sur les drosophiles ayant la phénotype choisi.
- changer de compteur autant de fois que nécessaire.
En cas d'erreur, cliquer sur le point coloré qui
sert de repère et confirmer que l'on désire l'effacer.
- calculer les pourcentages ou les différentes proportions.
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Apport pédagogique de cette technique de comptage
: Les deux élèves d'un groupe travaillent ensemble
sur la même observation et peuvent confronter leur point de vue. Le
professeur peut vérifier la reconnaissance des phénotypes.
Si certains élèves ont travaillé sur la même
image, les résultats peuvent être confrontés. Il peut
aussi être opportun de s'interroger sur le tri éventuel opéré
par la méthode d'échantillonnage : n'y a-t-il pas un certain
tri au moment où l'on transfère les drosophiles du tube d'élevage
à l'erlenmeyer dans lequel elles ont été endormies ?
Ou dans le deuxième transfer de cet erlenmeyer à la boîte
de Pétri ?
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