Quels sont les besoins nutritifs des cellules chlorophylliennes ?

Culture d'algues unicellulaires

 La culture présentée ici est une souche d'Euglène (Euglena gracilis) fournie par la société Sordalab.


Préparation :
  • On prépare, dans des conditions stériles, 1 série de petites boîtes de Pétri contenant le milieu de culture.
  • On ensemence, dans des conditions stériles avec une goutte de suspension d'Euglènes.
  • Une des boîtes contenant le milieu de culture est placée à l'obscurité, les autres sont placées à la lumière. Ces dernières boîtes sont placées au réfrigérateur les unes à la suite des autres à raison d'une ou deux par jour. La durée totale des mesures est de 6 jours.

Travail à réaliser : 
  • Notez la composition du milieu de culture utilisé.
  • Scannez la série de boîtes de Pétri contenant les cultures d'algues. Bien repérer la disposition des boîtes 

  • (attention : l'image est vue de dessous).
  • Utilisez l'image obtenue ou les images datées  (0 h, 48 h...) pour mesurer la variation de l'opacité de la suspension au cours du temps. Utilisez pour cela la fonction de mesure de lumière sur un rectangle de Mesurim (voir ci-dessous).
  • Notez vos résultats sur votre compte-rendu. 
  • Tracez un graphique récapitulant les résultats observés. (Variation de l'opacité en fonction du temps). (ce travail peut être fait avec l'outil tableau de Mesurim)

  • Commentez les résultats obtenus.

Milieu de culture pour Euglènes
(composition aimablement communiquée par la société Sordalab).
Composition pour 1 L de milieu
 Composé
 Quantité
 (NH4)2SO4   1 g
 K2HPO4  0,65 g
 MgSO4, 7 H2O  0,5 g
 CaCl2  0,2 g
 (NH4)2HPO4  0,5 g
 ZnCl2  0,1 g
 MnSO4  0,1 g
 On ajoute 1 goutte de perchlorure de fer, 3 mL d'acide (le pH est ajusté à 3,5) et, après stérilisation, de la vitamine B.

Evaluation de l'évolution du nombre d'individus :

   Principe 

La chlorophylle contenue dans les cellules d'algues, absorbe les radiations bleues (et certaines radiations rouges), ce qui lui donne sa couleur verte.
    La mesure de l'absorption de la lumière bleue, sur les images obtenues au scanner, permet d'évaluer la progression du nombre d'individus. On suppose pour cela que la quantité de chlorophylle par individu ne change pas.
 


Animation construite à partir des photographies obtenues au scanner.
Durée totale : 123 h .
Modalités pratiques
  • Ouvrir la première image (0 h) en l'appelant par le menu Aide du logiciel Mesurim. 
  • Mesurer la densité optique dans le bleu pour cette image. Noter la valeur dans un tableau. (voir modalités de la mesure).
  • Opérer de la même manière pour les autres images.
  • Construire la courbe correspondante.