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Préparation |
Observation des bandes de coloration |
Les protéines
les plus petites (albumine) migrent le plus loin, les plus grosses (gamma-globulines)
migrent moins loin.
Lecture optique des bandes pour évaluer les concentrations des différentes protéines |
Plus la concentration en protéines est forte dans
une portion de gel, plus la coloration est forte. On peut donc évaluer
les concentrations des différentes catégories de protéines
par mesure optique de la densité de coloration sur la bande.
La lecture optique se fera grâce à un système
ExAO que l'on passe sur la bande.
A défaut de système de lecture spécifique,
on peut utiliser un scanner. La densité de couleur des images sera
ensuite lue avec les outils du logiciel Mesurim. C'est l'utilisation
de ce logiciel qui est présentée dans la suite.
Si on dispose d'un
scanner à plat compatible Twain, la scannérisation peut se faire
à l'aide du logiciel Mesurim ce qui évitera d'avoir à créer
une échelle pour l'image avant la mesure. C'est l'utilitaire normal de
scannérisation, propre au scanner qui est appelé par Mesurim.
Choisir les paramètres de scannérisation sans détrammage
ni changement de contraste... qui modifieraient l'image par rapport au
document d'origine.
Indiquer la résolution utilisée par le scanner lorsque
le logiciel le demande. Cela permet d'établir l'échelle de
l'image.
On remarque un décalage vers le haut de la courbe sur la droite du graphique. Cela correspond à la couleur de fond rose de la droite de l'électrophorèse. La durée utilisée était sans doute insuffisante pour une séparation complète.
Comparaison avec les électrophorèses de malades |
On peut récupérer les protéines
en découpant un morceau d'une bande d'électrophorèse.
Comment , à partir de l'électrophorèse
d'un malade atteint de tétanos, peut-on tester l'hypothèse
que les gamma-globulines comprennent bien les anticorps ?