Transfert direct du gène insecticide de B. thuringiensis
dans des cellules de maïs

Etapes

Illustrations

 

Outils et techniques associés
1
Repérer un caractère intéressant dans un organisme vivant : la bactérie Bacillus thuringiensis.

Examen du génome.

Identifier la protéine responsable de ce caractère (ici : protéine toxique pour un insecte ravageur).
 

1

Cartographie du génome

Séquençage

2 Identifier et isoler le gène d'intérêt Obtention d'un mélange de fragments d'ADN.
Identification d'un gène dans un mélange de fragments.
2
Enzyme de restriction.

Southern blot


3

Transférer de l'ADN
Introduction d'un fragment d'ADN plasmidique bactérien dans des cellules de plants de maïs.
 
3
(34 Ko)
Canon à particules

 

4


 

Contrôler l'efficacité du transfert chez l'hôte
Par détection directe des transgènes.

 

4
Hybridation in situ

PCR

5 Divisions des cellules modifiées de plants de maïs.
 
 
 
 
 
 

 

5
Multiplication cellulaire
in vitro
6 Régénération de plants de maïs à partir des cellules modifiées.
Certains d'entre eux fabriquent la protéine toxique pour la pyrale.
De même pour les épis produits par la plante entière de maïs transgénique.
6