Sur colonie de bactéries,
sur plage de lyse
Objectif : détecter parmi un grand nombre de bactéries
ou de phages recombinants celle ou celui qui contient le fragment d'ADN
recherché (criblage de banque).
En pratique : la banque est étalée sur une ou plusieurs
boîte de Pétri, puis une empreinte de chaque boîte est
réalisée par le dépôt d'une membrane (nylon
ou nitrocellulose) pendant qq instants. La membrane contenant qq bactéries
ou phages de chaque clône, est placée dans une solution de
soude pour faire éclater les bactéries ou phages et dénaturer
l'ADN. Après fixation, hybridation et autoradiographie, il est possible
de localiser le clône d'intérêt.
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