expression des gènes de classe A, B et C
Par sbreuil
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25/04/2018 16:20
Différentes images permettant de mettre en évidence l'expression des gènes ABC chez la plante sauvage.
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Expression d'un gène de classe B
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Par sbreuil
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05/10/2015 15:00
- L'expression du gène est étudié à l'aide d'un gène rapporteur. Le gène codant pour la protéine GUS (béta-glucuronidase) est mis sous contrôle du promoteur du gène APETALA3 d'A. thaliana. La construction est ensuite insérée dans le génome de la plante par transgenèse. Les zones d'expression du gène GUS correspondent aux zones d'expression du gène APETALA3. La protéine GUS est capable de transformer un substrat incolore en un produit bleu. La présence de la protéine GUS est ici révélée sur des méristèmes entiers, observés microscopie optique. Les parties bleues correspondent donc aux zones d'expression du gène APETALA3. Il s'agit, dès le stade 4 (st4) des verticilles 2 et 3. D'après Lamb. et al., 2002 development 129:2079-2086
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Expression du gène de classe C
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Par sbreuil
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05/10/2015 15:00
- Hybridation in situ à l'aide d'une sonde spécifique à l'ARNm du gène AGAMOUS d'A. thaliana. La sonde est reconnue par un anticorps spécifique couplé à une enzyme capable de transformer un substrat incolore en un produit coloré. Après révélation, les coupes hybridées sont observées en microscopie optique, avec un éclairage permettant d'accentuer le contraste (en Normarski ou DIC pour differential interferential contrast). Les zones qui apparaissent en marron sur les images correspondent donc aux zones où le gène AGAMOUS est transcrit. Il s'agit pour les stades 3 et 4 (st3 et st4) du centre du méristème floral puis pour le stade 6 (st6) et le stade 6 tardif (late) des verticilles 3 et 4. D'après Prunet et al., Plant cell 2008 20:907-919
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Expression d'un gène de classe A
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Par sbreuil
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05/10/2015 15:00
- Hybridation in situ à l'aide d'une sonde spécifique à l'ARNm du gène APETALA1 d'A. thaliana. La sonde est marquée à l'aide de nucléotides radioactifs et révélée par autoradiographie. Les grains d'argent apparaissent en rouge en fluorescence. Les zones qui apparaissent en rouge sur les images correspondent donc aux zones où le gène APETALA1 est transcrit. Il s'agit de l'ensemble du méristèmes pour les stades très précoces (st1 et st2) puis des verticilles 1 et 2 pour les stades suivants (st4 et st6). D'après Liljegren, S. J., et al. Plant Cell 1999;11:1007-1018
